活化T淋巴細胞篩選——多色流式細胞術解決方案

 

T淋巴細胞是一種重要的免疫活性細胞,由一群功能不同的異質性淋巴細胞組成,在胸腺內分化成熟,在整個免疫應答中處于中心環節。在T細胞發育不同階段,其細胞膜分子表達的種類和數量均不相同。譬如,初始T細胞胞體小,細胞質少,表達CD45RA、CCR7、CD62L、CD127和CD132等,但不表達一些活化相關的標志物,例如CD25(晚期)、CD44、CD69、CD45RO或HLA-DR(較晚期)。因此T淋巴細胞在活化的不同階段細胞表面會表達不同的活化分子,它們是檢測T淋巴細胞是否被有效誘導活化的標準。

 

T淋巴細胞

 

1、細胞毒T細胞(cytotoxic T cell):消滅受感染的細胞。這些細胞的功能就像一個“殺手”或細胞毒素,因為它們可以對產生特殊抗原反應的目標細胞進行殺滅。細胞毒T細胞的主要表面標志是CD8,也被稱為殺手T細胞。

2、輔助T細胞(helper T cell)在免疫反應中扮演中間過程的角色:它可以增生擴散來激活其它類型的產生直接免疫反應的免疫細胞。輔助T細胞的主要表面標志是CD4。 T細胞調控或“輔助”其它淋巴細胞發揮功能。

3、調節/抑制T細胞(regulatory/suppressor T cell):負責調節機體免疫反應。通常起著維持自身耐受和避免免疫反應過度損傷機體的重要作用。調節/抑制T細胞有很多種,目前研究最活躍的是CD25+ CD4+ T細胞。

4、記憶T細胞 (memory T cell):在再次免疫應答中起重要作用。記憶T細胞由于暫時沒有非常特異的表面標志。

 

由此可知,T細胞及其亞群可以根據細胞表面表達的不同標志物而區分,如CD3,CD4,CD8和CD25等。使用這些結合了熒光的抗體直接標記這些標志物之后,多色流式分析技術就可以幫助研究者對單個細胞同時進行多個標志物的測量,而這可以提供特定樣品關于細胞系以及細胞亞群分化階段的信息。

 

流式細胞術研究專家exbio可提供活性T細胞篩選試劑盒,助您實現活性T細胞的免疫分型。

貨號 名稱 規格 說明
ED7705 DryFlowEx ACT T Screen Kit
活性T細胞篩選試劑盒
50tests 基于不同熒光標記的抗體CD45/CD8/CD4/PD-1/ HLA-DR/CD3/CXCR5/CD38對活化的T淋巴細胞亞群進行免疫表型分析

 

試劑盒中抗體信息:

 

CD試劑盒中抗體信息

活性T細胞篩選試劑盒

 

說明書下載

結果分析——新冠病毒患者外周血樣本分析:

 

新冠病毒患者外周血樣本分析

 

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學的事例。

上圖設門分析用于鑒定患者外周血中活化的細胞毒性CD8 + T淋巴細胞。下圖顯示了患者住院期間幾個時間點測得的細胞頻率(占T細胞的百分比)。

 

細胞毒性CD8 + T淋巴細胞

 

流式細胞術表型分析策略,用于鑒定正常人外周血中活化的T細胞。

1.單重態細胞

2.白細胞

3.淋巴細胞

4.CD3 + T淋巴細胞

5.CD4 +與CD8 + T淋巴細胞

下中部:活化的CD8 +細胞毒性T淋巴細胞

右下:循環的濾泡輔助性T淋巴細胞

右上:激活的CD4 +輔助/誘導T淋巴細胞

 

CD4 +與CD8 + T淋巴細胞

 

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學的示例。

上圖設門分析用于鑒定患者外周血中活化的輔助/誘導劑CD4 + T淋巴細胞。

下圖顯示了患者住院期間幾個時間點測得的細胞頻率(占T細胞的百分比)。

 

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學

 

需要住院的COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學的示例。

上圖顯示了用于識別患者外周血中循環性T輔助濾泡細胞的設門策略。

下圖顯示了患者住院期間幾個時間點測得的細胞頻率(占T細胞的百分比)。

 

COVID-19患者中免疫細胞頻率動力學

 

使用ED7705 活性T細胞篩選試劑盒在正常人外周血中對活化的細胞毒性CD8 + T淋巴細胞(左),活化的輔助/誘導性CD4 + T淋巴細胞(中)和循環T輔助濾泡細胞(右)進行流式細胞儀表面染色。 圖顯示了每種細胞亞群的頻率(占T細胞的百分比)。

 

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