DNA倍性分析:Blue Feulgen DNA倍性分析染色試劑盒解決方案

 

今日上班路過高架,發現路邊的路燈掛上了紅燈籠,一個路燈下一串紅彤彤的燈籠,不由感嘆2020就要就結束了,馬上就要過年啦。很多學校的小伙伴已經放假回家,雖然放假很開心,但是呢也要關注各個地方的防疫政策,放假直接回家,哪也不要去瞎溜達,盡管那個地方目前是低風險的,咱們也不能掉以輕心。今日大寒,又遇臘八,寒冬臘月過,便是春之始。相信春天到來時,我們就可以踏春出游啦!

 

 

言歸正傳,我們的今天來聊聊Feulgen?DNA倍性分析。Feulgen反應是非常經典的顯示DNA的組織化學反應,雖然是1924年發明的(想想那個時候的中國人民正生活在水深火熱之中,那一年國共開始第一次合作,孫中山組建北伐軍,廣州沙面工人罷工等等),至今這種方法仍是DNA定量測定主要染色方法之一。在病理學研究上,將組織進行冷凍切片、快速石蠟切片等制片后,運用圖像分析系統及顯微分光光度計對細胞DNA含量進行測定和分析,對判斷病癥的良惡性有重要的參考價值。

 

Feulgen染色程序的基礎是使用鹽酸水解,從DNA分子的脫氧核糖骨架上去除嘌呤。新暴露的脫氧核糖具有一個醛基,然后可以通過用Schiff試劑(在這種情況下,甲酚紫和硫酸的水溶液用于測試醛的存在)染色來識別。普通的Feulgen是用Schiff試劑與游離的醛基進行結合行成紫紅色化合物,只要有DNA就呈現紫紅色。產生的染色顏色數量與染色核中存在的DNA數量成正比。我們今天說的Blue Feulgen顯示的結果確實藍色的。反應機理可表示為:

 

2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3

 

Cat#DPK500:Blue Feulgen DNA Ploidy Analysis Staining Kit

 

Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒是一種組織化學試劑盒,用于量化細胞中的核DNA含量。該試劑盒可用于各種類型的標本,從細胞離心機制備到福爾馬林固定石蠟包埋組織切片。

 

Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒組分

藍色Feulgen染色液2 x 500ml ;

脫色劑10管

沖洗試劑10瓶

 

儲存:染色劑的瓶子可以反復打開,并應在2-8o C的溫度下保存。在轉換為希夫試劑后,染色劑應在15分鐘內使用。脫色劑和沖洗劑的小瓶為一次性使用而設計,應在2-8oC或18-25oC下保存。

 

樣本和試劑準備:該試劑盒針對不同的樣本有不同的制樣方法,均在說明書上有詳細介紹,大家感興趣歡迎查閱:https://www.scytek.com/productPDF/Specsheet/DPK500-IFUrev2.pdf

 

染色結果,圖左為細胞染色;圖右為組織染色結果:

 

Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒 Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒

 

結果是不是與傳統的紅色結果是不是大不相同。雖然顏色不一樣,但是原理卻是一樣的。

 

Blue Feulgen DNA Ploidy分析染色試劑盒特點和優勢

獨特的配方消除了染料沉淀,比傳統的基于Feulgen試劑的試劑盒染色更干凈。該染色試劑盒針對DNA Ploidy標本進行了優化,這些標本將被染色,然后在圖像分析系統上進行掃描和查看。

 

注意事項

從這個反應機理公式上看2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3,整個反應過程時會產生少量的SO2的,所以大家在實驗過程中要做防護措施,戴好口罩,不用在實驗區域吃東西喝水喝酒喝飲料,也不要抽煙!!還有就是不管做什么實驗都要有一個良好的實驗習慣,做完實驗即使清理廢棄物和擦拭桌面喲!

 

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